外泌體(Exosomes)是一種被細胞釋放到細胞外的囊泡(Extracellular vesicles, EVs)，它們攜帶生物活性分子，如蛋白質、核酸、脂質等，能夠在細胞之間進行信息傳遞和調控多種生理和病理過程，也因此興起各類型細胞外囊泡的研究與探討。然而，從培養細胞的培養基或生物液體中進行分離和純化外泌體(Exosomes)仍然是一個艱困的任務；常見純化的方式為差速離心法或者尺寸排除層析法，雖然操作便利且純化程序快速，但其純度不高及放大量產不易的問題仍未被克服，而免疫親和層析法具有純度高的優勢。因此，本研究設計以瓊脂糖為基底材料製備親和性肝素化瓊酯糖微球HepCAMs做為純化EV的介質，透過其專一性捕捉的特性及微球載體容易量產的優點，期望達到更好的純化效果。將瓊脂糖水溶液透過油包水的乳化方式，並透過降溫得到物理交聯瓊脂糖微球(AMs)，接者與交聯劑反應得到化學交聯瓊脂糖微球(CAMs)，成功提升微球的機械強度，粒徑介於56-145µm，尺寸接近於生物製劑的市售瓊脂糖微球；透過環氧氯丙烷改質CAMs得到環氧化瓊脂糖微球(EpCAMs)，將環氧基團與肝素Heparin共價結合，製備出肝素化瓊脂糖微球(HepCAMs)，並比較改質不同濃度肝素對純化外泌體之影響。人類肺癌之肺泡上皮細胞培養液經HepCAMs純化後，透過TEM觀察呈典型外泌體的凹盤狀結構，顆粒濃度1.62×109 Particles/mL，相較於市售尺寸排除層析法能處理的外泌體量低，但其純度為8.9×107 Particles/µg of protein，較尺寸排除法純度高2倍左右，且經流式細胞儀證實具有CD9、CD63和CD81外泌體的免疫特徵，而HepCAMs 1.00之CD81螢光強度較尺寸排除層析法明顯，並利用螢光染色確認經HepCAMs所純化之外泌體具有較高的生物活性，能被人類胚胎腎細胞攝取。此外本研究證明肝素與外泌體存在特異性吸附，有助應用於純化細胞培養液之外泌體。
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